مجله دانشگاه علم پزشکی شهرکرد/ دره 9 شماره 2/ خرداد تیر 88-97 96/ مقاله پژهشی بررسی شیع آلدگی سالمنال اینترتیدیس سالمنال تیفی مریم در گشت های عرضه شده در شهرکرد سال 9 مهشید 4 *2 زاهدی ابراهیم رحیمی مریم زاهدی حسن ممتاز حسن شجاعی 2 گره زیست شناسی احد شهرکرد دانشگاه آزاد اسالمی شهرکرد ایران گره بهداشت ماد غذایی احد شهرکرد دانشگاه آزاد اسالمی 4 شهرکرد ایران دانشگاه علم پزشکی شهرکرد شهرکرد ایران گره میکربیلژی دانشگاه علم پزشکی اصفهان اصفهان ایران. تاریخ دریافت: 95/2/ تاریخ پذیرش: 95/6/29 چکیده: زمينه هدف: سالمنال در انسان بيماری ه یا مختلف مانند تب رده حصبه شبه حصبه عفنت خن مسمميت ه یا غذایی را ایجاد می کند. گشت شيرخام از مهم ترین منابع آلدگی انسان به سالمنال می باشند. از این ر در این تحقيق به بررسی آلدگی سالمنال تيفی مریم سالمنال اینترتيدیس گشت ه یا قرمز سفيد خام در سطح شهرستان شهرکرد پرداخته شد. رش بررسی: در این مطالعه تصيفی- مقطعی تعداد 60 نمنه شامل 98 نمنه گشت گا 6 نمنه گشت شتر 75 نمنه گشت گسفند 62 نمنه گشت بز 89 نمنه گشت مرغ از مراکز عرضه شهرستان شهرکرد جمع آری از نظر آلدگی به سالمنال به رش کشت آزمن ه یا بيشيميایی آزمن PCR مرد آزمایش قرار گرفتند. در ادامه سالمنال تيفی مریم سالمنال اینترتيدیس جدا شده از نظر ژن های حدت inva, rfbj, flic, fljb, spv, sefa مرد بررسی قرار گرفتند. یافته ها: در این تحقيق در مجمع 54 نمنه از 60 نمنه به گنه های سالمنال آلده بدند. بيشترین آلدگی در گشت مرغ )%/64( در نمنه گشت گا )%/26( گشت بز )%8/06( گشت گسفند )%8( گشت شتر )%5/5( مشاهده شد. از مجمع 54 جدایه سالمنال 24 ایزله آلده به سالمنال تيفی مریم 20 ایزله آلده به سالمنال اینترتيدیس 0 ایزله مربط به سایر سرتيپ ه یا سالمنال بد. بررسی ژن های حدت ایزله ها نشان داد تمام آن ها حامل ژن های مرد بررسی بدند. نتيجه گيری: نتایج حاصله بيانگر این است که درصد قابل تجهی از نمنه های گشت ه یا قرمز سفيد دارای آلدگی سالمنالیی هستند. از این ر الزم است با کنترله یا بهداشتی نظارت دقيق در کشتارگاه ها از ميزان آلدگی گشت کاسته شد. اژه های کليدی: سالمنال تيفی مریم سالمنال اینترتيدیس گشت قرمز گشت مرغ. مقدمه: امرزه با پیشرفت تکنلژی علم صنایع غذایی بیماری های ناشی از غذا به عنان مهم ترین مسأله در جهان می باشد. در سراسر جهان صدها میلین انسان به بیماری های قابل انتقال از طریق غذا آب مبتال هستند )(. این مشکل در کشرهای در حال تسعه در میان افرادی که به ضعف سیستم ایمنی یا سء تغذیه مبتال هستند در حال افزایش است )2(. پیدایش پاتژن های منتقله از غذا اثرات آن ها بر ری سالمت عممی جامعه یکی از مهم ترین چالش های ایجاد شده در سیستم مراقبت بهداشت می باشد. گنه های سالمنال 0927877 * نیسنده مسئل: شهرکرد- دانشگاه آزاد اسالمی- احد شهرکرد- گره بهداشت ماد غذایی- تلفن: 88 E-mail: ebrahimrahimi55@yahoo.com
شیع آلدگی سالمنال اینترتیدیس سالمنال تیفی مریم مهشید زاهدی همکاران از جمله این پاتژن های نظهر جهانی می باشد که از طریق انتقال تسط ماد غذایی بیماری های منتقله از غذا را رز به رز افزایش داده آن را به یک معضل بهداشتی در جهان تبدیل کرده است. مطالعات اپیدمیلژی نشان داده که غذاهای با منشاء حیانی مخزن عمده بیماری هایی هستند که تسط غذا منتقل میشد )(. از بین باکتری های بیماری زا گنه های سالمنال لیستریا یرسینا در محدده گناگنی از ماد غذایی شامل گشت فرآردههای گشتی لبنیات سبزیجات شایع اند )4(. آلدگی ماد غذایی با این پاتژن ها ممکن است در مراحل مختلف زنجیره غذایی شامل تلید فرآری تزیع خرده فرشی ها یا آماده نمدن )5(. شد ایجاد بیماری سالمنلزیس که تسط گنه های جنس سالمنال ایجاد میشد در سال 984 به عنان عامل تهدید کننده جدید سالمت عممی تسط سازمان بهداشت جهانی اعالم گردید جدی جهت FAO.)6( گاسترآنتریت حاد تب رده ای تیفئید یا پاراتیفئید عفنت های سیستمیک گاهی سپتی سمی کشنده از جمله مارد ایجاد شده تسط سالمنال هستند )7(. از سالمنلزیس یکی از بیماری های عمده ناشی ماد غذایی است که اخیرا منجر به نگرانی هایی در سطح بهداشت عممی شده است )8(. الین گزارش مربط به شیع عفنت غذایی ناشی از سالمنال تسط گارتنر در سال 888 در آلمان بد )9(. در مطالعات متعدد شیع سالمنلزیس در کشرهای مختلف از %2/74 تا %/8 گزارش شده است )0 8(. این باکتری تقریبا 25 میلین عفنت حدد 200000 مرگ در سطح جهان ایجاد می نماید )(. با تجه به میزان مرگ میر باال این مسأله به عنان خطر جدی تلقی میگردد. نظر به پژهش ها اطالعات آماری مجد محصالتی از جمله گشت مرغ گشت گا تخم مرغ ماهی شیر منشاء سالمنلزیس های ناشی از ماد غذایی گزارش شده اند )2(. سالمنال از خاناده انترباکتریاسه است. این باکتری گرم منفی فاقد اسپر میله ای شکل است که تسط فالژلهای اطرافی حرکت می کند )(. بر اساس آخرین طبقه بندی اعضای جنس سالمنال به د گنه سالمنال انتریکا سالمنال بنگری تقسیم می شد. سالمنال انتریکا بر اساس یژگی های بیشیمیایی هملژی DNA شامل 7 زیر گنه است که هر کدام دارای شامل سرتایپ های مختلفی هستند. بیشتر آن ها برای انسان حیان بیماری زا هستند عمما انتقال بیماری از طریق آب غذا صرت می گیرد )4 7(. از بین سرتتیپ های مختلف سالمنال سرتیپ های سالمنال انتریتیدیس سالمنال تیفی مریم در مقام ال عفنت های غذایی قرار دارند دارای شیع گسترده ای در آسیا )کره ژاپن تایلند( میباشند )5(. سالمنال تیفی مریم از جمله گنه های است که عاله بر دارا بدن میزبان های زیاد دارای مقامت محیطی باال نیز می باشند لذا قدرت تکثیر زنده به مدت طالنی در محیط نمنه های غذایی را دارند )6 7(. با تجه به اینکه سالمنال به عنان یک میکرارگانیسم مقام در ماد غذایی مطرح می باشد آزمایش های میکربیلژی ماد غذایی برای حضر این پاتژن الزامی است. رش های تشخیصی ملکلی مانند Multiplex PCR در کنار کشت سایر رش های باکتری شناسی می تاند در تأیید تشخیص کمک کننده باشد )2(. اگرچه مطالعات محددی در خصص بررسی ضعیت برخی ماد غذایی به سالمنال در تعدادی از استان های کشر طی سالیان گذشته انجام شده اما گزارش ثبت شده ای محددی از مقامت ضد میکربی ژن های حدت سالمنالهای جدا شده از اناع گشت قرمز سفید در استان چهارمحال بختیاری استان های همجار جد دارد لذا نظر به اهمیت گشت فرآرده های آن در رژیم غذایی نقش گشت در انتقال باکتری های بیماری زا چن سالمنال بر آن شدیم تا شیع سالمنال را در گشت قرمز مرغ عرضه شده به صرت بسته بندی غیر بسته بندی را در شهرستان شهرکرد مرد بررسی قرار گیرد. عاله بر آن عامل حدت در سرتیپ های سالمنال 89
مجله دانشگاه علم پزشکی شهرکرد/ دره 9 شماره 2/ خرداد تیر 96 تیفی مریم سالمتال اینترتیدیس به رش اکنش نمنه ها در در 4000 rpm به مدت 0 دقیقه مایع ریی زنجیره ای پلیمراز مرد بررسی قرار گرفت. رسب به عنان منبع DNA استفاده شد )2(. آزمایش PCR جهت ردیابی ژن های مرد مطالعه رش بررسی: در این مطالعه تصیفی- مقطعی در فاصله زمانی مهر تا آذر سال 9 از مناطق مختلف شهرستان شهرکرد 60 نمنه گشت شامل: 89 نمنه گشت مرغ 75 نمنه گشت گسفند 98 نمنه گشت گا 62 نمنه گشت 6 بز نمنه گشت شتر به طر تصادفی ساده از قصابی ها مراکز عرضه گشت سفید قرمز جمع آری در اسرع قت در شرایط سترن به آزمایشگاه کنترل کیفی دانشگاه آزاد اسالمی منتقل شد. 25 گرم از نمنه ها به 225 سی سی محیط پیش غنی کننده آب پپتنه منتقل شد در گرمخانه در دمای 7 درجه سانتی گراد به مدت 24 ساعت قرار داده شد. سپس یک سی سی از محیط پیش غنی کننده به محیط سلنیت سیستئن منتقل به مدت ساعت گرمخانه 24 گذاری شد در ادامه از محیط سلنیت سیستئین در محیط سالمنال- شیگال آگار برلیانت گرین آگار به صرت خطی کشت داده شد به مدت 24 ساعت به ترتیب در دمای در 7 درجه سانتی گراد 4 درجه سانتی گراد گرمخانه گذاری شدند. پرگنه های بی رنگ با مرکز سیاه در محیط سالمنال- شیگال آگار پر گنه های زرد inva شامل )جهت تشخیص جنس سالمنال( ژن STM4492 )جهت تشخیص گنه سالمنال تیفی مریم( sdf ژن ژن های حدت )جهت تشخیص گنه سالمنال انتریتیدیس( spv flib flic rfbj inva sefa تسط زج پرایمرهای اختصاصی که به طر خالصه در جدل شماره آرده شده انجام گردید )9(. برای انجام از دستگاه PCR استفاده شد. اکنش Master cycle gradient (Ependorf) PCR در حجم 25 میکرلیتر اجد 2/5 میلی لیتر بافر PCR0X /5 میلی لیتر کلرید منیزیم میکرمل زج پرایمر 200 میکرمل dntp Mix F,R احد آنزیم Tag DNA Polymerase 5 میکرلیتر از DNA مربط به هر ایزله انجام شد. برنامه حرارتی مرد نظر با تجه به نع ژن متفات بده به شرح زیر انتخاب گردید. برای ژن inva یک سیکل 94 درجه به مدت 6 دقیقه 4 سیکل تکراری 95 درجه دقیقه 59 درجه دقیقه 0 ثانیه 72 درجه دقیقه 0 ثانیه یک سیکل انتهایی 72 درجه 8 دقیقه. در مرد ژن های STM4492 Sdf یک سیکل 94 درجه 6 دقیقه 40 سیکل تکراری 94 درجه 50 ثانیه 56 درجه دقیقه 72 درجه 70 ثانیه یک سیکل انتهایی 72 درجه fljb flic rfbj inva رنگ با مرکز سیاه در محیط برلیانت آگار به عنان 8 دقیقه. در مرد ژن های 5 6 94 پرگنههای مشکک انتخاب جهت تست های تکمیلی یک سیکل درجه دقیقه سیکل تکراری چن تست اره IMVIC مرد آزمایش قرار 94 درجه 60 ثانیه 57 درجه دقیقه 72 درجه 60 ثانیه TSI گرفتند. باکتری هایی که از نظر آزمن های بیشیمیایی یک سیکل انتهایی 72 درجه 8 دقیقه. در مرد ژن های سالمنال تشخیص داده شدند جهت تأیید تشخیص به spv sefa یک سیکل 94 درجه 6 دقیقه 5 سیکل رش ملکلی مرد آزمایش قرار گرفتند. تکراری 94 درجه 60 ثانیه 57 درجه دقیقه 72 درجه جهت استخراج DNA باکتری های مرد نظر از 60 ثانیه یک سیکل انتهایی 72 درجه 8 دقیقه )20(. رش جشاندن استفاده شده است. به این منظر نمنه های جهت ردیابی محصل مرد نظر از ژل %2 آگارز استفاده تأیید شده آلده به سالمنال را در محیط آب پپتنه کشت شد. جهت تهیه ژل 2 گرم پدر آگارز در 00 میلی لیتر داده بعد از گذشت 24 ساعت 00 میکرلیتر از کشت بافر TBEذب بعد از اضافه کردن 5 میکرلیتر رنگ یک شبه باکتری در محیط مایع آب پپتنه با 500 میکرلیتر DNA safe stain )ساخت شرکت سینا ژن- ایران( به آن آب مقطر به مدت 0 دقیقه جشانده شد پس از سانتریفژ در قالب مخصص الکترفرز 096+ ریخته شد. برای 90
شیع آلدگی سالمنال اینترتیدیس سالمنال تیفی مریم مهشید زاهدی همکاران انجام الکترفرز 5 میکرلیتر از محصل PCR میکرلیتر رنگ نشانگر با که ترکیبی از رنگ برم فنل بل یک ماده غلیظ چسبنده مانند سکرز یا گلیسرل می گردید. ملکل باشد. جدل شماره : نام ژن های مخلط در DNA چاهک ژل منتقل به دلیل دارا بدن گره تالی پرایمرهای مرد استفاده جهت ردیابی نام پرایمر سالمنال اینترتيدیس فسفات دارای بار منفی بده به سمت قطب مثبت حرکت می کنند. جهت تعیین اندازه باند مرد نظر در الکترفرز از مارکر DNA Styinva-JHO-2Right InvA* استفاده گردید. الکترفرز در لتاژ ثابت 90 لت به مدت حدد 0 دقیقه انجام گرفت )تصایر شماره 2(. ژن های مرد مطالعه در سالمنال تيفی مریم تالی پرایمر -5 AAACGTTGAAAAACTGAGGA زن محصل )bp( 99 299 759 284 66 8 TCGTCATTCCATTACCTACC AAATGTGTTTTATCTGATGCAAGAGG GTTCGTTCTTCTGGTACTTACGATGAC ACAGCTTGGCCTACGCGAG AGCAACCGTTCGGCCTGAC GTGAAATTATCGCCACGTTCGGGCAA TCATCGCACCGTCAAAGGAACC CCAGCACCAGTTCCAACTTGATAC GGCTTCCGGCTTTATTGGTAAGCA ATAGCCATCTTACCAGTTCCCCC GCTGCAACTGTTACAGGATATGCC Styina-JHO-2left Sdf-F Sdf-R STM4492-F STM4492-R ST9-s St4-as Rfbj-s Rfbj-as FLic-s FLic-as Sdf STM 4492 inva rfbj flic 526 ACGAATGGTACGGCTTCTGTAACC FLjb-s fljb TACCGTCGATAGTAACGACTTCGC FLjb-as 260 GCCGTACACGAGCTTATAGA S Spv ACCTACAGGGGCACAATAAC S2 0 GCAGCGGTTACTATTGCAGC SEFA2 sefa TGAGACAGGGACATTTAGCG SEFA4 *: ژن تعیین جنس سالمنال. جهت آنالیز آماری نتایج حاصل از ردیابی سرتیپ های سالمنال تیفی مریم سالمنال اینترتیدیس در نمنه های گشت خام مرد مطالعه بررسی اناع ژن های حدت از نرم افزار آماری SPSS مدل های آماری مربع کای دقیق فیشر با سطح اطمینان %95 استفاده شد. در این آزمن ارتباط معنی داری بین د داده در نظر گرفته شد. 9
مجله دانشگاه علم پزشکی شهرکرد/ دره 9 شماره 2/ خرداد تیر 96 تصیر شماره : ژل حاصل از الکترفرز محصل PCR این ژل مربط به ژن های )759 STM4492 جفت باز( )0 sefa جفت باز( )8 fljc جفت باز( )526 flib جفت باز( در سالمنال تیفی مریم می باشد. ستن M= مارکر 00 جفت بازی DNA )فرمنتاس لیتانی(. تصیر شماره 2: ژل حاصل از الکترفرز محصل PCR این ژل مربط به ژن های )99 inva جفت باز( )260 spv جفت باز( )299 sdf جفت باز( )66 rfbj جفت باز( در سالمنال اینترتیدیس می باشد. ستن M= مارکر 00 جفت بازی DNA )فرمنتاس لیتانی(. یافته ها: شناسایی گنه در مطالعه حاضر از رش کشت PCR جهت های سالمنال تیفی مریم سالمنال اینترتیدیس تعیین فراانی حضر اناع ژن های حدت ایزله های جدا شده از گشت های قرمز سفید استفاده شد. جدل شماره 2 آلدگی گشت های قرمز سفید به سالمنال تیفی مریم سالمنال اینترتیدیس را نشان می دهد. بر پایه این نتایج مجمعا 54 نمنه از 60 نمنه گشت قرمز سفید به سالمنال آلده بدند. بیشترین شیع آلدگی مربط به نمنه گشت مرغ )%/46( به دنبال آن گشت گا )%/26( گشت بز )%8/06( گشت گسفند )%8( گشت شتر )%5/5( بد. با تجه به جدل شماره 2 از بین 54 ایزله سالمنالی جدا سازی شده در مرحله کشت بر پایه آزمن های اکنش زنجیره ای پلیمراز مشخص شد 24 نمنه آلده آلده بین به سالمنال تیفی مریم 20 نمنه به سالمنال اینترتیدیس می باشند. همچنین در نمنهها 8 نمنه همزمان به سالمنال تیفی مریم 92
شیع آلدگی سالمنال اینترتیدیس سالمنال تیفی مریم مهشید زاهدی همکاران سالمنال اینترتیدیس آلدگی جد داشت 0 ایزله مربط به سایر گنه نشد. حدت سرتیپ های سالمنال بد که تشخیص در بخش دیگری از مطالعه به بررسی ژن inva, rfbj, flic, fljb, spv, sefa سالمنال تیفی مریم های در گنههای سالمنال اینترتیدیس جدا شده از نمنه ها پرداخته شد که نتایج نشان داد تمام ایزله ها حامل ژن های حدتsefA inva, rfbj, flic, fljb, spv, بدند. جدل شماره 2: نع نمنه گشت گا گشت گسفند گشت بز گشت شتر گشت مرغ جمع کل بحث: درصد تعداد نمنه 98 در تجزیه تحلیل آماری نتایج اختالف آماری معنی داری بین میزان آلدگی نمنه های گشت شتر گشت مرغ مشاهده شد. در آزمن دقیق فیشر اختالف آماری معنی داری بین آلدگی با سرتیپ های سالمنال تیفی مریم سالمنال اینترتیدیس در ایزله های جدا شده از گشت مرغ نیز بین سرتیپ سالمنال اینترتیدیس جدا شده از نمنه گشت مرغ با گشت شتر گسفند بز مشاهده شد. فراانی آلدگی نمنه های گشت به سالمنال تيفی مریم سالمنال اینترتيدیس در درصد فراانی نمنه های سالمنال مثبت /26 گشت خام قرمز سفيد سالمنال تيفی مریم 7 سالمنال اینتریدیدیس 4 آلدگی همزمان سایر سرتيپ ها 2-6 0-4 8 2-20 2 9 24 8 8/06 5/5 /46 5 75 62 6 89 60 طی سالهای اخیر قع بیماری های میکربی ناشی از ماد غذایی نه تنها در کشرهای در حال تسعه با فقر بهداشتی بلکه در کشرهای تسعه یافته با استاندارد باالی بده افزایش به ر نیز بهداشتی است. باکتری سالمنال از خطرناک ترین عامل بیماری ناشی از غذا بده است که دارای گسترش جغرافیایی سیعی است قادر به ایجاد عفنت در طیف سیعی از مجدات زنده از جمله انسان حیانات در قدم الین طیر می باشد )2(. حل راه مشکل شناخت دقیق ابعاد جزییات آن است که بدن ارزیابی دقیق میزان شیع سالمنال در گشتهای مختلف نمی تان به مشکالت پی برد برای شناسایی منابع آلدگی رشی سریع حساس دقیق الزم است تا با دقت سرعت باال جد سالمنال را در ماد غذایی نشان دهد. زمان برای پیشگیری از فاجعه در حال قع ناشی از همه گیری سالمنلز فاکتر بسیار مهمی است می تاند منجر به قطع به مقع چرخه عفنت گردد )22(. آزمن نتایج مطالعه حاضر طی کشت میکربی های بیشیمیایی تأیید تشخیص به رش اکنش زنجیره ای پلیمراز نشان داد که از میان 98 نمنه گشت گا %/26 75 نمنه گسفند %8 62 نمنه بز %8/06 6 نمنه شتر %5/5 89 نمنه مرغ %/46 در مجمع از سالمنال بدند. %5 نمنه 54 نمنه 60 آلده به در مطالعه Ejeta همکاران که به منظر شیع سرتیپ های سالمنال در گشت گا گسفند 9
مجله دانشگاه علم پزشکی شهرکرد/ دره 9 شماره 2/ خرداد تیر 96 %7/4 شد. انجام اتیپی در خک گشت گا اینترتیدیس بیشتر می باشد. همچنین در پژهش سلطان.)2( خک گسفند سالمنال به آلده بدهاند همکاران دالل مرغ گشت های نمنه %8/47 بررسی خصص در همکاران حکیمی کردن جدا گشت های سالمنال به قرمز بدند آلده %8/28 از سالمنال از سایل محل کار گشت فرشی های تهران بده نیز جدا شده پاراتیفی آلده ها نمنه %8 داد نشان اند. %5/7 سالمنال اینترتیدیس از B سالمنال به سالمنالهای %50 سالمنال تیفی مریم %5/2 سالمنال تعیین گردید. %2 چرخ گشت ها %8 تخته های برش %8 سایل کار %4 یخچال های نمنه در برداری در مجمع شده %2 سالمنال به گشت آلده ها فرشی بدند آلدگی سالمنالیی مشاهده شد که نشان دهنده چرخه رند انتقال گشت درمانی آلدگی است در.)24( بیمارستان طی مفید نصرتی مراحل آلدگی فرآری همکاران گشت در گا تزیع مرکز به سالمنال را %8/8 اعالم نمدند. در حالی که آلدگی گشت مرغ به سالمنال دیده نشد )2(. نتایج تحقیقات فق همگی بیانگر آلدگی سالمنالیی در گشت قرمز می باشد که در تحقیق حاضر نیز چنین نتایجی حاصل شد. همچنین در مطالعه پرجعفر همکاران با بررسی 84 نمنه گشت شتر تک کهانه کشتار شده در نجف آباد پرداخت که از این تعداد تنها سه مرد مثبت که شامل یک مرد آلدگی به سالمنال پارا تیفی که در این بین گردید )8(. در مطالعه ای سهم سالمنال اینترتیدیس %8/9 اعالم دیگر Yang همکاران انجام دادند میزان آلدگی گشت های مختلف به گنه های سالمنال را در چین به شرح زیر گزارش کردتد: %54 از نمنه های مرغ % از نمنه های خک %7 از نمنه های گا %20 گشت سالمنال سالمنال به بره انتریتیدیس آلده %5/ بده تیفی که از نمنه های از مریم میان این %4/ % سبرا 0 ایندیانا %7/9 بیشترین شیع را در گنه های یافت شده داشتند )27(. این تحقیق نیز بیانگر تعداد بیشتر آلدگی در گشت مرغ نسبت می باشد که تأییدکننده نتایج حاضر می باشد. به سایر گشت ها بررسی ژن های حدت inva, rfbj, flic, fljb از گنه های سالمنال تیفی مریم ژن های حدت spv sefa از سالمنال اینترتیدیس جدا شده از نمنه های مرد مطالعه حاکی از آن است که تمام ایزله ها حامل ژن های حدت مذکر بدند. به طر مشابهی مطالعه ای از عمادی چاشنی همکاران در خصص بررسی خصصیات گنه های سالمنال جدا شده از ججه های کبابی در شمال ایران حاکی از د مرد آلدگی به سالمنال تیفی مریم گزارش حضر تمام ژن های حدت مرد اشاره در سالمنالی گردید که حاکی از آلدگی بسیار پایین گشت شتر جدا شده از نمنه ها می باشد )9(. شایگان می باشد )25(. همکاران نیز در بررسی فاکترهای یرالنس گنه های در مطالعه ای که تاج بخش همکاران بر ری سالمنال تیفی مریم سالمنال اینترتیدیس در شیر گشت مرغ انجام دادند نشان داد %28 از نمنه های فرآرده های لبنی نشان دادند که ژن های spv گشت مرغ آلدگی سالمنالیی داشته که از این تعداد در تمام ایزله های سالمنال اینترتیدیس sefa آن را سالمنال تیفی مریم داده تشکیل ژن های inva, rfbj, flic, fljb نیز در تمام %50 است )26(. نتایج ممتاز همکاران بر ری 620 نمنه ایزله های سالمنال تیفی مریم حضر داشتند که نتایج مرغ بیانگر آلدگی الشه های مرغ به سالمنال تیفی مشابه نتایج تحقیق حاضر می باشد )28(. همچنین %42/8 مریم سالمنال اینترتیدیس )به ترتیب مطالعه ای از کچک زاده همکاران حاکی از حضر ژن inva در تمام سالمنالهای جدا شده از 0 مدفع %5/7 الشه های آلده به سالمنال( می باشد )20(. در مطالعه ما نیز میزان سالمنال تیفی مریم از سالمنال حیان مرد بررسی بده است )29(. 94
شیع آلدگی سالمنال اینترتیدیس سالمنال تیفی مریم مهشید زاهدی همکاران نتیجه گیری: در مجمع نتایج مطالعه حاضر مطالعات قبلی بیانگر آلدگی گشت مرغ با فراانی بیشتر همچنین گشت قرمز به سالمنال می باشد با تجه به اهمیت گشت در رژیم غذایی احتمال برز عفنت از طریق گشت های آلده به سالمنال تشخیص سریع آلدگی سالمنالیی اهمیت بیشتری پیدا می کند که رش اکنش زنجیره ای پلیمراز دارای حساسیت باالیی می باشد. سالمنال نظارت بسته از این بهسازی دقیق بندی ر برای بهداشتی گشت تجهیز در رعایت جلگیری کشتارگاه مراحل اصل آلدگی از های مختلف بهداشتی با صنعتی کشتار تسط کارگران نظارت کنترل مراحل مختلف نگهداری انتقال اعم از سردخانه ها ماشین های منتقل کننده به مراکز برای فرش جلگیری آلدگی از متقاطع رعایت مارد بهداشتی در مراکز عرضه گشت تسط فرشنده ها رعایت اصل HACCP تلید پرسه در بحرانی گشت شناسایی نقاط ایجاد آگاهی عممی آمزش رش های جلگیری سالم سازی... منابع: غذایی ماد پیشنهاد می گردد. مشکک تشکر قدردانی: پختن طریق از انجماد این مقاله منتج از پایان نامه )کد 050790 مرخ 9/5/( در رشته کارشناسی ارشد میکربیلژی دانشگاه آزاد اسالمی احد شهرکرد می باشد که بدینسیله از کلیه افرادی نمده اند سپاسگزاری می نماییم. که در انجام این پایان نامه همکاری. Egli T, Koster W, Meile L. Pathogenic microbes in water and food: Changes and challenges. FEMS Microbiol Rev. 2002; 26(2): -2. 2. Todd E. Epidemiology of foodborne diseases: A worldwide review. World Health Stat Q. 996; 50(-2): 0-50.. Soltan Dallal MM, Khalilian M, Masoumi Asl H, Bakhtiari R, Davoodabadi A, Rajabi Z. Identification of Salmonella serotypes in foodborne outbreaks by sequencing of ITS region of 6S-2SrRNA. J Shahrekord Univ Med Sci. 206; 8(): 7-80. 4. Van Nierop W, Duse A, Marais E, Aithma N, Thothobolo N, Kassel M, et al. Contamination of chicken carcasses in Gauteng, South Africa, by Salmonella, Listeria monocytogenes and Campylobacter. Int J Food Microbiol. 2005; 99(): -6. 5. Petersen KE, James WO. Agents, vehicles, and causal inference in bacterial foodborne disease outbreaks: 82 reports (986-995). J Am Vet Med Assoc. 998; 22(2): 874-8. 6. Gallegos-Robles MA, Morales-Loredo A, Alvarez-Ojeda G, Osuna-Garcia JA, Martinez IO, Morales-Ramos LH, et al. PCR detection and microbiological isolation of Salmonella spp. from fresh beef and cantaloupes. J Food Sci. 2009; 74(): M7-40. 7. López FE, de las Mercedes Pescaretti M, Morero R, Delgado MA. Salmonella Typhimurium general virulence factors: A battle of David against Goliath? Food Res Int. 202; 45(2): 842-5. 8. Freitas CG, Santana AP, Silva PH,Goncalves VS, Barros Mde A, Torres FA, et al. PCR multiplex for detection of Salmonella Enteridis, Typhimurium and occurrence in pouitry meat. Int J Food Microbiol. 200; 9: 5-22. 9. Amirmozaffari N, Rahmani Z, Iesazadeh K. Evaluation of the Level of Contamination with Salmonella spp. in Red Meat, Chicken, and Domestic and Industrial Eggs Produced in Talesh City and Assessment of Their Antibiotic Resistance Pattern, Iran. Qom Univ Med Sci J. 20; 7(5): 60-6. 0. Jamshidi A, Bassami MR, AfshariNic S. Identification of salmonella SPP and by a multiplex PCR-based assay from poultry carcasses in Mashhad-Iran. Int Vet Res. 2009; (): 4-8. 95
مجله دانشگاه علم پزشکی شهرکرد/ دره 9 شماره 2/ خرداد تیر 96. Ngan GJ, Ng LM, Lin RT, Teo JW. Development of a novel multiplex PCR for the detection and differentiation of Salmonella enterica serovars Typhi and Paratyphi A. Res Microbiol. 200; 6(4): 24-8. 2. Saroj SD, Shashidhar R, Karani M, Bandekar JR. Rapid, sensitive, and validated method for detection of Salmonella in food by an enrichment broth culture - nested PCR combination assay. Mol Cell Probes. 2008; 22(): 20-6.. Harvey RA, Champe PC, Fisher BD. Microbiology. 2 nd ed. Philadelphia: Mosby; 2007: 5-8. 4. Oosterom J. Epidemiological studies and proposed preventive measures in the fight against human salmonellosis. Int J Food Microbiol. 99; 2(): 4-5. 5. Solhan S, Chan PP, Kurupatham L, Foong BH, Ooi PL, James L, et al. An outbreak of gastroenteritis caused by Salmonella enterica serotype Enteritidis traced to cream cakes. Western Pac Surveill Response J. 20; 2(): 2-0. 6. Karami A, Ranjbar R, Ahmadi Z, Safiri Z. Rapid detection of different serovares of Salmonella entrica by multiplex PCR. Iran J Publ Health. 2007; 6(2): 8-42. 7. Skjolaas K, Burkey T, Dritz S, Minton J. Effects of Salmonella enterica serovars Typhimurium (ST) and Choleraesuis (SC) on chemokine and cytokine expression in swine ileum and jejunal epithelial cells. Vet Immunol Immun. 2006; (): 99-209. 8. Soltan Dalal MM, Taremi M, Modaesi S, Zolfaghareyan K, Moezardalan S, Zali M. Prevalence of Salmonella serotype in meat and poultry and detection of antibiotic resistance in Tehran. Pajohandeh 2007; (57): 245-252. 9. Emaddi Chashni S, Hassanzadeh M, Bozorgmehri Fard M, Mirzaie S. Characterization of the Salmonella isolates from backyard chickens in north of Iran, by serotyping, multiplex PCR and antibiotic resistance analysis. Arch Razi Inst. 2009; 64(7): 77-8. 20. Momtaz H, Ghaedamini M, Momeni M. Detection of virulence factors in Salmonella typhimurium and Salmonella enteritidis serotypes isolated from chicken meat in Chaharmahal va Bakhtiari Province of Iran. J food Microbiol. 204; (): 7-22. 2. NosratiSh, Sabokbar A, Dezfolian M, Taraei B, Falah F. Prevalence of Salmonella serotype typhimurium, S.Enteritidis in food from Mofid Hospital. J Res Med Sci. 202; 6(): 4-8. 22. Hoseynpour M, SabokbarAzar, Bakhtiari A, Parsa Sh. Comparison of bacterial culture, elisa and pcr techniques for detection of salmonella in poultry meat samples collected from Tehran. J Microb World. 20; 6(20: 62-72. 2. Ejeta G, Molla B, Alemayehu D, Muckle A. Salmonella serotypes isolated from minced meat beef, mutton and pork in Addis Ababa, Ethiopia. Rev Med Vet. 2004; 55: 547-5. 24. Hakimi Najafabadi S. Isolation of Salmonella from Tehran butcheries and their utensils and equipments. 7 th Iran Congress of Microbiology, Semnan, Iran; 2004. 25. Pourjafar M, Mahzounieh M, Zahraei Salehi T, Habibollahi Khorasgan A. The serological survey of salmonella infection incamels (camelus dromedarius) of Najafabad, Iran. Iran J Vet Clinic Sci. 200; (2): 29-6. 26. Tajbakhsh F, Tajbakhsh E, Khamesipour F. Isolation and identification of serotype from chicken meet in Isfahan city. Iran J Infect Dis Trop Med. 205; 20(68): 75-9. 27. Yang B, Qu D, Zhang X, Shen J, Cui S, Shi Y, et al. Prevalence and characterization of Salmonella serovars in retail meats of marketplace in Shaanxi, China. Int J Food Microbiol. 200; 4(): 6-72. 28. Shayegannia S, Rostami F, Safarpouur Dehkordi F, Rahimi E, Yahaghi E, Khodaverdi DE, et al. Isolation and evaluation virulence factors of and salmonella intertidis in milk and dairy products. Iran J Med Microbiol. 204; 8(): 54-6. 29. Oskouizadeh K. Detection of Salmonella spp. from some wild captive herbivores in Iran and determination of serogroup, antibiotic susceptibility and presence of inva gene in the isolated strains. Arch Razi Institute. 205; 70(2): 8-7. 96
Journal of Shahrekord University of Medical Sciences (J Shahrekord Univ Med Sci) 207; 9(2): 88-97. Original article Prevalence of Salmonella enteritidis and S. typhimurium in marketed meat in Shahrekord in 204 Zahedi M, Rahimi E 2*, Zahedi M, Momtaz H, Shojaii H 4 Biology Dept., Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, I.R. Iran; 2 Food Hygiene Dept., Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, I.R. Iran; Shahrekord University of Medical Sciences, Shahrekord, I.R. Iran; 4 Microbiology Dept., Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, I.R. Iran. Received: 0/Apr/206 Accepted: 9/Sep/206 Background and aims: Salmonella, which causes different diseases in human, such as typhoid, paratyphoid, septicemia, and salmonellosis (food poisoning). Food products such as meat and raw milk are the most common sources of human salmonella infection. Therefore, in this research, it was studied the Salmonella typhimurium and Salmonella enteritidis contamination of raw red and white meat in Shahrekord. Methods: This was a cross-sectional study, 60 samples of different types of meat (98 samples of cow, 6 samples of camel, 75 samples of sheep, 62 samples of goat, and 89 samples of chicken) were collected from sale centers in Shahrekrd town, and was tested about contamination by bacterial culture, biochemical, and PCR tests. In the following, S.typhimurium and S.entertidis isolated on the bases of intensity gens inva, rfbj, flic, fljb, spv, sefa were studied. Results: In this study, 54 meat samples were contaminated with salmonella. The highest rate of contamination was observed in chicken (.64%) while the contaminated rate in cow, goat, sheep, and camel was.26%, 8.06%, 8%, and 5.5%, respectively. In addition, out of 54 isolated, 24 were contaminated with and 20 with Salmonella entertidis. The rest 0 isolated were contaminated with other serotypes. Prevalence of intensity gens of isolations show that all of them included reviewed gens. Conclusion: The findings show that the red and white meat is contaminated with salmonella. Therefore it is necessary to reduce this contamination in slaughterhouses with hygienic controls and strict supervision. Keywords: Salmonella tiphimurium, Salmonella enteritidis, Red meat, Chicken meat. Cite this article as: Zahedi M, Rahimi E, Zahedi M, Momtaz H, Shojaii H4. Prevalence of Salmonella enteritidis and S. typhimurium in marketed meat in Shahrekord in 204. J Shahrekord Univ Med Sci. 207; 9(2): 88-97. * Corresponding author: Food Hygiene Dept., Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, I.R. Iran. Tel: 0098927877, E-mail: ebrahimrahimi55@yahoo.com 97